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熒光模式下圖像過亮或過暗,細胞不可見,原因和明場(BF)模式有很大不同,主要問題可能出在“光立方"(Light Cube)或“熒光通道的曝光設置"上。
一、明場模式(Brightfield)下的核心調節
在明場模式下,解決圖像過暗或過亮的核心是調整圖像的采集參數。
1、找到調節入口
在主屏幕上,先點擊進入“調節(Adjust)"界面。
2、調整亮度(Brightness)
(1)原理:通過滑動條控制成像亮度。過亮會使圖像白化,過暗則信號不清。
(2)關鍵參考:圖像應當使活細胞內部呈現均勻的明亮狀態。
3、調整大小(Size)
原理:設定算法認可的細胞直徑范圍(如4-60μm)。設置過小會遺漏大的細胞,過大則可能誤將氣泡等雜質計入。
二、熒光模式下的專項設置
熒光模式下出現“過暗"(信號弱)或“過曝"(背景白),幾乎都與“光立方"和“曝光設置"直接相關。
1、檢查并重置“光立方"
“光立方"是Countess 3 FL執行熒光激發的核心模塊,它的異常是導致熒光圖像問題的首要原因。
(1)問題現象:屏幕亮度不均、部分區域過曝或過暗。
(2)解決步驟:
軟件升級:聯系技術支持確認并更新儀器軟件至最新版。
重置:在“設置(Settings)"菜單中找到“改變光立方(Change Light Cube)"選項并執行,完成后重啟儀器。
2、優化“曝光設置"
每條熒光通道的曝光參數是獨立、且需要優化的。
(1)操作路徑:在“調節(Adjust)"界面,選擇并進入對應通道,通過滑塊調整曝光強度。
(2)核心原則:寧低勿高。建議先從一個較低值開始,再逐漸提升,直到獲得亮度適中、邊緣清晰的圖像。
三、輔助排查與進階優化
如果上述操作均未能改善,可以繼續排查以下幾個方面:
1、檢查光源硬件:確認儀器的光源模塊是否正常工作,如有故障需聯系售后更換。
2、優化圖像識別:在“調節(Adjust)"界面,通過精調“亮度"和“大小"門限值來優化算法識別,或在“調節"界面點擊“默認"恢復初始參數。
3、升級軟件系統:從下載最新固件并更新,有助于修復圖像處理Bug。
4、執行硬件復位:拔掉電源線5分鐘以上,讓儀器放電以清除硬件緩存,然后重新啟動。
四、何時聯系技術支持?
如果在嘗試以上所有方法后問題依舊,可能是內部光學或傳感器硬件故障。建議提前收集好儀器的型號、序列號和軟件版本,并準備好 問題發生時的熒光通道和染料信息,以便高效溝通。