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技術(shù)文章

  • 2026

    3-4

    核酸電泳DNA電泳與RNA電泳比較

    這是一個(gè)從臨床血清蛋白電泳轉(zhuǎn)向分子生物學(xué)基礎(chǔ)技術(shù)的重要話(huà)題。核酸電泳（DNA和RNA電泳）是分子生物學(xué)、基因工程和分子診斷中最核心的分離和鑒定技術(shù)之一。下面我將系統(tǒng)地梳理DNA電泳與RNA電泳，并重點(diǎn)比較它們的異同。一、核酸電泳DNA電泳與RNA電泳核心目的與原理1、共同目的：根據(jù)核酸片段（DNA或RNA）的大小（長(zhǎng)度）進(jìn)行分離、鑒定、純化和定量。2、基本原理：（1）基質(zhì)：通常在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進(jìn)行。瓊脂糖凝膠用于分離較長(zhǎng)的片段（100bp-25kb），聚丙烯酰胺...

  • 2026

    3-4

    血清蛋白電泳原理與目的

    我們來(lái)系統(tǒng)地梳理一下血清蛋白電泳。這是一個(gè)非常重要的臨床實(shí)驗(yàn)室檢查，用于分析血清中主要蛋白質(zhì)的組成和比例。它像一條“蛋白質(zhì)的河流”，根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷和大小，在電場(chǎng)中被分離成不同的區(qū)帶。一、血清蛋白電泳原理與目的1、原理：將血清樣本點(diǎn)在瓊脂糖凝膠或醋酸纖維素薄膜上，置于電場(chǎng)中。血清中的各種蛋白質(zhì)帶有不同的凈電荷和分子量，因此在電場(chǎng)中以不同的速度向正極或負(fù)極遷移，從而被分離開(kāi)來(lái)。2、主要目的：（1）篩查和診斷：特別是對(duì)單克隆免疫球蛋白增殖性疾病（如多發(fā)性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥）...

  • 2026

    3-4

    Eppendorf艾本德Research plus十二道移液器校準(zhǔn)步驟

    以下是為內(nèi)部質(zhì)量控制或定期檢查而設(shè)計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟。如果您的移液器用于關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)或需要出具認(rèn)證報(bào)告，強(qiáng)烈建議送至專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)。通過(guò)稱(chēng)量移液器分配的超純水的重量，結(jié)合當(dāng)前溫度下的水密度，計(jì)算出實(shí)際移液體積，與目標(biāo)體積對(duì)比，計(jì)算誤差。一、艾本德十二道移液器校準(zhǔn)前準(zhǔn)備1、環(huán)境與設(shè)備：（1）環(huán)境條件：在無(wú)風(fēng)、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行。室溫控制在20-25°C，濕度45%。確保移液器、超純水、天平、容器在同一房間內(nèi)靜置平衡至少1-2小時(shí)，使溫度一致。（2）天平：使用高精度分析天平（例如，對(duì)于10...

  • 2026

    3-4

    蛋白質(zhì)電泳基本原理

    蛋白質(zhì)電泳是一種用于分離、分析和鑒定蛋白質(zhì)混合物的常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)。其核心原理是利用電場(chǎng)力驅(qū)動(dòng)帶電蛋白質(zhì)在凝膠介質(zhì)中遷移，根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷、大小和形狀等特性的差異實(shí)現(xiàn)分離。以下是詳細(xì)的工作原理和關(guān)鍵組成部分：一、蛋白質(zhì)電泳核心基本原理1、電荷性質(zhì)：（1）蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的生物大分子，其表面帶有正電荷（堿性氨基酸，如賴(lài)氨酸、精氨酸）或負(fù)電荷（酸性氨基酸，如天冬氨酸、谷氨酸）。（2）在特定pH值的緩沖液中，蛋白質(zhì)會(huì)帶上凈電荷（正電荷或負(fù)電荷）。當(dāng)置于電場(chǎng)中時(shí)，帶正電的蛋白質(zhì)會(huì)向負(fù)...

  • 2026

    3-3

    sds-page電泳分離蛋白質(zhì)步驟

    SDS-PAGE（十二烷基聚丙烯酰胺凝膠電泳）是分離蛋白質(zhì)混合物的核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)。以下是詳細(xì)的操作步驟、原理和關(guān)鍵注意事項(xiàng)，便于您理解和操作。一、SDS-PAGE基本原理1、變性：SDS使蛋白質(zhì)變性，破壞其二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)，并將大量負(fù)電荷均勻覆蓋在肽鏈上，掩蓋了蛋白質(zhì)原有的電荷差異。2、電荷一致：所有SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物均帶負(fù)電，在電場(chǎng)中向陽(yáng)極遷移。3、分子篩效應(yīng)：聚丙烯酰胺凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)對(duì)不同大小的蛋白質(zhì)產(chǎn)生不同阻力。分子量越小，遷移越快。因此，SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的遷移率...

  • 2026

    3-3

    eppendorf艾本德Research plus八道移液器校準(zhǔn)步驟

    艾本德（Eppendorf）Researchplus系列移液器是精密儀器，定期校準(zhǔn)對(duì)保證移液準(zhǔn)確性至關(guān)重要。其校準(zhǔn)分為兩個(gè)主要部分：機(jī)械校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證。一、艾本德Researchplus八道移液器重要提示1、建議：對(duì)于高精度要求或認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室（如ISO/GMP），建議將移液器送至艾本德服務(wù)中心或由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行校準(zhǔn)。2、自行操作：如果您具備經(jīng)驗(yàn)并擁有必要設(shè)備，可進(jìn)行日常的“用戶(hù)校準(zhǔn)”或“現(xiàn)場(chǎng)核查”。以下步驟基于手冊(cè)和通用標(biāo)準(zhǔn)。3、工具準(zhǔn)備：分析天平（精度需達(dá)0.01mg...

  • 2026

    3-3

    蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳注意事項(xiàng)

    蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室最核心的技術(shù)之一，其成功與否直接影響后續(xù)分析（如WesternBlot）的結(jié)果。以下是一份詳盡的注意事項(xiàng)清單，涵蓋了從樣品準(zhǔn)備到凝膠染色的全流程，以及常見(jiàn)問(wèn)題排查。一、實(shí)驗(yàn)前的核心原則1、還原與變性：確保蛋白質(zhì)變性并打開(kāi)二硫鍵，這是SDS-PAGE成功的基礎(chǔ)。使用含SDS（變性劑）和β-巰基乙醇或DTT（還原劑）的loadingbuffer，并充分煮沸（通常95-100℃，5-10分鐘）。2、負(fù)電荷均一化：SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合（每克蛋...

  • 2026

    3-3

    實(shí)驗(yàn)室電泳技術(shù)的分類(lèi)

    實(shí)驗(yàn)室電泳技術(shù)種類(lèi)繁多，主要根據(jù)支持介質(zhì)、分離原理和設(shè)備形式進(jìn)行分類(lèi)。以下是常見(jiàn)的分類(lèi)體系：一、按支持介質(zhì)分類(lèi)傳統(tǒng)的分類(lèi)方式，根據(jù)分離所用基質(zhì)的不同進(jìn)行劃分。1、瓊脂糖凝膠電泳（1）原理：利用瓊脂糖的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)分離生物大分子。（2）特點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，成本低，常用于核酸（DNA/RNA）分析。分辨率相對(duì)較低，適合分離100bp至數(shù)十kb的核酸片段。常用染料：溴化乙錠（EB）、GelRed、SYBR系列等。2、聚丙烯酰胺凝膠電泳（1）原理：通過(guò)丙烯酰胺單體聚合形成孔徑更小、更均勻...

  • 2026

    3-3

    eppendorf艾本德Research plus單道移液器校準(zhǔn)步驟

    這是EppendorfResearch®plus單道移液器的詳細(xì)校準(zhǔn)步驟。請(qǐng)注意，此操作需要專(zhuān)業(yè)的校準(zhǔn)設(shè)備和環(huán)境，通常應(yīng)由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的人員或服務(wù)工程師在實(shí)驗(yàn)室完成。自行校準(zhǔn)可能影響精度并導(dǎo)致保修失效。以下步驟結(jié)合了指南和行業(yè)通用標(biāo)準(zhǔn)，分為內(nèi)部調(diào)整（用戶(hù)可進(jìn)行的基本檢查與微調(diào)）和外部正式校準(zhǔn)（建議由專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行）兩部分。一、艾本德Researchplus單道移液器性能檢查（驗(yàn)證）這是判斷移液器是否需要校準(zhǔn)或維修的一步。1、預(yù)清洗：將移液器調(diào)至MAX量程，反復(fù)吸排蒸餾水?dāng)?shù)次...

  • 2026

    3-2

    實(shí)驗(yàn)室配膠緩沖液系統(tǒng)對(duì)電泳的影響？

    實(shí)驗(yàn)室配膠緩沖液系統(tǒng)是聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）的核心要素之一，其組成和性質(zhì)直接影響電泳的分辨率、穩(wěn)定性、效率和安全性。以下是緩沖液系統(tǒng)對(duì)電泳的具體影響及關(guān)鍵因素分析：一、緩沖液系統(tǒng)的核心作用1、維持pH穩(wěn)定性：緩沖液維持凝膠和電泳槽中的pH恒定，確保蛋白質(zhì)/核酸的電荷狀態(tài)一致，避免pH波動(dòng)導(dǎo)致條帶扭曲或遷移率改變。2、提供導(dǎo)電離子：緩沖液中的離子（如Tris、甘氨酸、MOPS等）形成電流通路，影響電場(chǎng)強(qiáng)度和產(chǎn)熱。離子濃度過(guò)高可能導(dǎo)致產(chǎn)熱過(guò)多，過(guò)低則電阻增大、電泳速度慢。...
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